引物(wù)设计(jì)软件(Primer design software)下载(zǎi),是一款行业软件软件!引物(wù)设(shè)计软件是一(yī)款由加拿大的Premier公司开发(fā)的专业用于PCR或测序引物以及杂交探针的设计,评估的软件(jiàn),其(qí)主要界面(miàn)是(shì)分为序列编辑窗口(Genetank),引(yǐn)物设计窗口(Primer Design),酶(méi)切分析窗口(Restriction Sites)和(hé)纹基分析窗口(Motif)。
“Premier”的(de)主要(yào)功能(néng)分四大块,其中有三(sān)种功能比(bǐ)较常用,即引物设计、限制性(xìng)内切酶位点分析和DNA 基元(yuán)(motif)查找。“Premier”还具有同源性分(fèn)析功能,但并非其特(tè)长(zhǎng),在此略过。此(cǐ)外,该(gāi)软(ruǎn)件还(hái)有一(yī)些特殊功(gōng)能(néng),其中最重要的是设计简并引物(wù),另(lìng)外还(hái)有序列“朗(lǎng)读”、DNA 与蛋白(bái)序列的互换、语(yǔ)音提示键盘输入(rù)等等。
有(yǒu)时需要根据一段氨基(jī)酸(suān)序列反推到DNA 来设(shè)计引物,由于大多数(shù)氨(ān)基酸(20 种(zhǒng)常见结(jié)构氨基(jī)酸中的18 种)的遗传密(mì)码不只一种(zhǒng),因此,由氨基酸序列反推DNA 序(xù)列时,会遇到(dào)部分(fèn)碱(jiǎn)基的不(bú)确定性。这样设计并合成的引物实际上是(shì)多(duō)个序列的(de)混(hún)和物,它们(men)的序列组成(chéng)大部分(fèn)相(xiàng)同,但(dàn)在某些(xiē)位点(diǎn)有所变化(huà),称(chēng)之为简(jiǎn)并(bìng)引物。遗传密码规则因物种或细(xì)胞亚结构的不(bú)同而异(yì),比如在线粒体内的遗(yí)传密码(mǎ)与细胞核(hé)是不一(yī)样的。“Premier”可以针对模板DNA 的来源(yuán)以相(xiàng)应(yīng)的遗(yí)传密码规则转换DNA 和氨基酸序(xù)列。软件共给出八种生(shēng)物亚(yà)结(jié)构的(de)不(bú)同遗传(chuán)密码(mǎ)规则供用户选(xuǎn)择,有纤毛虫大核(Ciliate Macronuclear)、无脊椎动物(wù)线粒体(Invertebrate Mitochondrion)、支(zhī)原体(tǐ)(Mycoplasma)、植物线粒体(Plant Mitochondrion)、原(yuán)生动物线粒(lì)体(Protozoan Mitochondrion)、一般标(biāo)准(Standard)、脊椎动物线粒体(Vertebrate Mitochondrion)和酵母线粒体(Yeast Mitochondrion)。
引(yǐn)物设计软(ruǎn)件是一款由加(jiā)拿大的Premier公司开发的(de)专业用于PCR或测序(xù)引物以(yǐ)及(jí)杂交探针(zhēn)的设计(jì),评估的软件,其主要界(jiè)面(miàn)是分为序列编(biān)辑窗口(Genetank),引物设计窗口(Primer Design),酶切分析窗口(kǒu)(Restriction Sites)和纹基分析(xī)窗口(Motif)。
其主要(yào)功能(néng)在(zài)主界(jiè)面上(shàng)一目了然。限制(zhì)性酶切点分析及基元查找功能(néng)比(bǐ)较简单,点击该功能按钮(niǔ)后,选择(zé)相应的限制性内切(qiē)酶或基元(如-10 序列,-35 序(xù)列等),按确定即可。常见的限(xiàn)制性内切酶和基元一般都可以找(zhǎo)到。你(nǐ)还(hái)可以编辑(jí)或者添加(jiā)新限制性内切酶或基元。
进行引物设计时,打开DNA序列后点击按钮(niǔ)primer,出现“search criteria”窗(chuāng)口,有多(duō)种参数可以调整(zhěng)。搜(sōu)索目(mù)的(Seach For)有(yǒu)三(sān)种(zhǒng)选项,PCR 引物(PCR Primers),测序引物(Sequencing Primers),杂交探(tàn)针(zhēn)(Hybridization Probes)。搜索类型(Search Type)可选择分别或同时查找上、下游(yóu)引物(Sense/Anti-sense Primer,或Both),或者成对查找(Pairs),或者分别以适合上、下游引物为(wéi)主(Compatible with Sense/Anti-sense Primer)。另外还可改(gǎi)变(biàn)选(xuǎn)择(zé)区域(Search Ranges),引物长度(Primer Length),选择方式(shì)(Search Mode),参(cān)数选择(Search Parameters)等等。使用(yòng)者可根(gēn)据(jù)自己的需要设定各项参数。如果没(méi)有特殊要求,建议使用(yòng)默认设置。然后按search,随之(zhī)出现的Search Progress 窗口中显示Search Completed 时(shí),再按OK,这时搜索结果以表格的(de)形(xíng)式出现,有三种显示方(fāng)式,上(shàng)游(yóu)引(yǐn)物(Sense),下游(yóu)引物(wù)(Anti-sense),成对显(xiǎn)示(shì)(Pairs)。默(mò)认显示为(wéi)成(chéng)对方(fāng)式(shì),并按(àn)优(yōu)劣次序(Rating)排列,满分为(wéi)100,即各指标基(jī)本都(dōu)能达标。
点击其中(zhōng)一(yī)对引物(wù),如第1#引物(wù),并把上(shàng)述窗口挪(nuó)开或(huò)退出,显示“Peimer Premier”主窗(chuāng)口, 所得结果分三部分(fèn),最(zuì)上面(miàn)是图(tú)示PCR 模板(bǎn)及(jí)产物位(wèi)置,中间是所选的上下游引物的一些(xiē)性质,最(zuì)下面是四种重要指标的分析,包括发夹结构(Hairpin),二聚体(Dimer),错(cuò)误(wù)引发情况(False Priming),及上下游引物之间二聚体形成情(qíng)况(Cross Dimer)。当所分析的引物(wù)有这四种(zhǒng)结构的形成可能时,按钮由变成,点(diǎn)击该按钮,在左下角(jiǎo)的窗口中(zhōng)就会出现该结构的(de)形成(chéng)情况(kuàng)。一对理想的引物应当(dāng)不存在任何一种上述结构,因此最好(hǎo)的情况(kuàng)是(shì)最下面的分析(xī)栏没有,只(zhī)有。值得(dé)注意的是(shì)中间一栏(lán)的末尾给出该引物的最(zuì)佳(jiā)退火(huǒ)温度(dù),可(kě)参考(kǎo)应用。
在需(xū)要对引物(wù)进行修饰编辑时,如在5’端加入(rù)酶切位(wèi)点,可(kě)点(diǎn)击,然后修(xiū)改引物(wù)序列。若要回到搜索结果中,则(zé)点击按钮。如果要设计简并引(yǐn)物,只需根据(jù)源氨基酸(suān)序列的物种(zhǒng)来源选择(zé)前述(shù)的(de)八(bā)种遗传密(mì)码(mǎ)规则,反推至DNA 序(xù)列(liè)即可(kě)。对简(jiǎn)并引(yǐn)物的分析不需(xū)像一(yī)般(bān)引物那样严格。总之,“Premier”有优秀的引(yǐn)物自动(dòng)搜索功能(néng),同时可进行部分指标的分析,而(ér)且(qiě)容易(yì)使用,是一个(gè)相当不错的软件。
